久久96热在精品国产三级,在线不卡日本v二区到六区,亚洲久久久一区二区三区,品久久久久久久久久久久

咨詢熱線

15000266580

當前位置:首頁  >  技術文章  >  病毒載體構建穩定細胞株有什么優勢?

病毒載體構建穩定細胞株有什么優勢?

更新時間:2018-10-27      點擊次數:2312
  病毒載體構建穩定細胞株有什么優勢?
  化學試劑介導的轉染方法和電轉,整合率低,同時整合位點不穩定,易發生再次丟失的情況,而且整合位點一般都在轉錄活躍區之外,所以并不是理想的穩定整合工具。另外,整合后的拷貝數是由核內的外源DNA局部濃度,而不是轉染時的DNA的量決定,而化學方法在輸入質粒載體入核的效率比電轉和病毒載體相比要低得多,導致其轉染相同細胞所用質粒載體用量要大大高于其它方法,造成入核質粒載體量難以控制,這也解釋了為什么化學轉染方法和其它兩種方比,更傾向于得到串聯多拷貝。以上種種因素,導致使用非病毒載體轉染方法構建穩定株,成功率低,穩定性差,穩定克隆株易出現不均一(含有非整合細胞)等缺點。
  逆轉錄病毒載體由于整合率高,是非常理想的穩定株構建工具。而且通過控制逆轉錄病毒載體轉導的實驗條件,理論上可以確保每個細胞只有單拷貝插入。同時由于病毒載體是通過病毒重組酶將外源片段整合入染色體中,其整合特性和病毒自身整合特性非常相似:偏向于轉錄活躍區段,且整合后非常穩定,在傳代100次后仍然保留在宿主基因組中。重要的是整合幾率和所有其它化學,物理轉染方法比,增加5至6個數量,使得穩定株構建不再成為實驗研究的障礙。由于整合幾率非常高,所以很容易獲得混合穩定株。
  腺病毒載體整合率和普通轉染方法差異不大,被認為是不能整合的一類病毒載體,因此相關研究數據較少,不建議用來構建穩定株。非野生型腺相關病毒載體(Rep-)整合率較低,但因為野生型病毒載體可以定點將病毒基因組整合于人19號染色體,所以從安全性和穩定性角度來說,潛力都非常巨大。由于諸多因素,研究人員仍然在對其進行改造中,包括考慮到嚙齒類動物不含有人19號染色體對應的整合位點序列。
聯系方式

郵箱:xiangfbio@163.com

地址:上海市虹口區四平路710號7層

咨詢熱線

400-821-8510

(周一至周日9:00- 19:00)

在線咨詢
  • 掃一掃 微信咨詢

Copyright©2025 上海復祥生物科技有限公司 All Right Reserved    備案號:滬ICP備10013034號-2     sitemap.xml
技術支持:化工儀器網    管理登陸
无码人妻丰满熟妇拍拍区| 加勒比系列视频在线观看| 99久久久国产精品人妖| 欧美人与牲交@欧美精品| 久久久久有精品国产白浆| 成人又大又爽的毛片在线| 中文字字幕在线精品亚洲| 日韩人妻无码精品一区二区三区| 欧美日韩精品一区人成线在| 欧美日韩亚洲| 美国黄色片一区二区三区| 十八禁啪啪啪一区二区三区| 精品三级国产三级在钱专区| dy888午夜国产精品| 国产精品原创巨作无遮挡| 亚洲av无码精品色午夜果冻不卡| 中文欧美国产日韩在线观看| 福利电影网影院午夜福利| 亚洲GV永久?码天堂网| 国产精品一区二区三区房景| 国产精品亚洲va在线观看| 日本中文字幕 在线观看| 中文字幕aⅴ第一页在线| 亚洲精品深夜av无码一区二区| 日本一区二区三区免费播放| 99久久久一区二区三区| 久久精品无码专区东京热| 在线日本精品a免费播放| 亚洲永久精品ww47| 国产精品成熟老女人| 亚洲xxx午休国产熟女屁| 国产日韩欧美精品综合在线| 吴梦梦国产精品一区久久| 国产99久久精品一区二区| 天天躁夜夜躁狠狠添婷婷| 坤巴插进小洞里在线观看| 性爱a片高清无码免费看| 性感小骚货在线吃大鸡巴| 果冻传媒在线观看九一制片厂| 日本二区三区视频在线观看| 午夜夜伦鲁鲁片免费无码|